Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:06 min. • July 8th, 2025
Pegue uma suspensão de células neurais, incluindo oligodendrócitos imaturos e células neuronais primárias, de um filhote de camundongo.
Ressuspenda as células em um tampão magnético de classificação de células para evitar a aglomeração de células.
Adicione microesferas magnéticas projetadas carregando anticorpos anti-O4 em sua superfície. Agite a solução para garantir uma mistura uniforme.
Incube para permitir que as microesferas se liguem ao galactolipídeo sulfatado, um antígeno O4 nos oligodendrócitos, enquanto outras células permanecem não ligadas ou fracamente ligadas.
Lave a mistura com tampão de classificação de células adicional.
Centrifugue e descarte o sobrenadante e, em seguida, ressuspenda as células.
Em seguida, passe as células ligadas ao grânulo em uma coluna de separação magnética equipada com um filtro que remove os aglomerados de células maiores.
Durante a corrida, sob um campo magnético, os complexos ligados a contas se movem em direção ao ímã, fixando-se nas laterais.
Lave para remover as células soltas e frouxamente ligadas.
Retirar a coluna do separador e lavá-la com um meio de proliferação para recolher os oligodendrócitos primários para futuras aplicações.
Ap
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