Preparação de um substrato micropadronizado para estudar fenótipos de células de Schwann

Pegue um wafer de silício com micropadrões da geometria desejada para cultivar células em uma forma definida.

Despeje uma mistura de polímeros sobre ele e deixe-o solidificar.

Corte um carimbo quadrado do polímero.

Cubra a superfície padronizada do carimbo com uma camada de proteína, o que facilita a fixação das células.

Usando uma corrente de ar, remova as proteínas ilimitadas.

Pegue uma lamínula revestida de polímero.

Coloque o lado estampado do carimbo nele.

Pressione o carimbo para transferir o padrão. Remova o carimbo.

Transfira a lamínula para um poço contendo um surfactante para revestir as superfícies nuas. Isso aumenta a hidrofobicidade da superfície, evitando a adesão celular indesejada.

Remova o surfactante e lave com um tampão fosfato.

Adicione as células de Schwann e deixe-as se ligar ao micropadrão.

Lave com um tampão para remover as células soltas.

Adicione o meio de cultura e incube.

À medida que as células crescem ao longo da superfície, elas assumem a forma de micropadrão, permitindo um estudo do fenótipo da célula de Schwann.

Para preparar um substrato micropadronizado, coloque um wafer de silício padronizado dentro de uma placa de Petri circular de 150 milímetro