Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:45 min. • July 8th, 2025
Pegue uma raiz nervosa e corte-a em pedaços pequenos.
Transfira para um tubo contendo enzimas digestivas e incuba.
A enzima digere a matriz extracelular.
Adicione meios contendo soro para interromper a digestão.
Pipetar o conteúdo repetidamente, centrifugar e eliminar o sobrenadante.
Ressuspenda o pellet.
Passe a suspensão por uma peneira para remover o tecido não digerido. Incube as células coletadas em uma placa.
Fibroblastos e células de Schwann ou SCs se ligam à placa e se dividem.
Remova as células soltas. Lave as células anexadas com um tampão fosfato.
Adicione enzimas digestivas para soltar os SCs sensíveis à digestão. Pare a digestão com meios.
Separe completamente os SCs adicionando mídia.
Transfira as células para um tubo e centrifugue. Rejeitar o sobrenadante e ressuspender as células em meios específicos para SC.
Transfira as células para uma placa não revestida e incuba.
Quaisquer fibroblastos restantes irão aderir, deixando os SCs em suspensão.
Transfira a suspensão para uma placa revestida com matriz.
Incubar para fixação e divisão de células de Schwann.
Corte os nervos em pedaços de 3 a 5 milímetros com uma tesoura. Adicione 1 mililitro de tripsina a 0,25% e transfi
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