Isolamento de células de Schwann de raízes espinhais de camundongos

0 visualizações • 3:45 min. • July 8th, 2025

Pegue uma raiz nervosa e corte-a em pedaços pequenos.

Transfira para um tubo contendo enzimas digestivas e incuba.

A enzima digere a matriz extracelular.

Adicione meios contendo soro para interromper a digestão.

Pipetar o conteúdo repetidamente, centrifugar e eliminar o sobrenadante.

Ressuspenda o pellet.

Passe a suspensão por uma peneira para remover o tecido não digerido. Incube as células coletadas em uma placa.

Fibroblastos e células de Schwann ou SCs se ligam à placa e se dividem.

Remova as células soltas. Lave as células anexadas com um tampão fosfato.

Adicione enzimas digestivas para soltar os SCs sensíveis à digestão. Pare a digestão com meios.

Separe completamente os SCs adicionando mídia.

Transfira as células para um tubo e centrifugue. Rejeitar o sobrenadante e ressuspender as células em meios específicos para SC.

Transfira as células para uma placa não revestida e incuba.

Quaisquer fibroblastos restantes irão aderir, deixando os SCs em suspensão.

Transfira a suspensão para uma placa revestida com matriz.

Incubar para fixação e divisão de células de Schwann.

Corte os nervos em pedaços de 3 a 5 milímetros com uma tesoura. Adicione 1 mililitro de tripsina a 0,25% e transfi

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Digestão Diferencial