Geração de fatias de amígdala inclinadas a partir de um cérebro de camundongo

Pegue um cérebro de rato imerso em um tampão gelado.

Remova o cerebelo e apare a seção anterior que contém o córtex pré-frontal medial, ou mPFC.

Prenda o tecido a um bloco de ágar angular, que é colado em um estágio de amostra de vibrato.

Anexe blocos de ágar adicionais para fornecer estabilidade durante o corte. Coloque o stage dentro da câmara de corte do vibratomo cheia de tampão gelado oxigenado.

Gere fatias inclinadas contendo a amígdala que respondem a estímulos de medo e projeções neuronais do mPFC, que formam conexões sinápticas na amígdala e regulam sua atividade.

Os cortes inclinados expõem as projeções, permitindo o estudo da conectividade funcional entre o CPFm e a amígdala.

Corte as fatias ao meio e coloque-as em uma câmara contendo líquido cefalorraquidiano artificial oxigenado em temperatura ambiente para estabilizar o tecido.

Incube as fatias na temperatura fisiológica para recuperar o tecido para ensaios a jusante.

Use um bisturi para cortar o cerebelo. Em seguida, isole a porção anterior do cérebro que contém o córtex pré-frontal medial. Encha a câmara de corte com solução de corte gelada mantida a 4 graus Celsius usando uma unidade de resfriamento. Oxigenar a sol