Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:05 min. • July 8th, 2025
Pegue um cérebro de camundongo em um tampão gelado e remova sua porção posterior contendo o cerebelo e a porção anterior com o córtex pré-frontal medial, ou mPFC.
A porção do meio contém regiões da amígdala que processam emoções como medo e ansiedade.
Mova a seção do cérebro para um papel de filtro para remover o excesso de buffer.
Cole-o em um palco e fixe um bloco de ágar atrás da seção para evitar seu movimento durante o corte.
Coloque este stage em uma câmara de corte de vibratomo com o buffer gelado.
Corte a seção para obter uma fina fatia de cérebro coronal.
Isso expõe as regiões da amígdala, que contêm conexões sinápticas entre os neurônios da amígdala e as projeções dos neurônios mPFC que regulam as respostas da amígdala.
Corte a fatia em duas metades, cada uma contendo uma região da amígdala.
Em seguida, transfira-os para uma câmara de interface contendo líquido cefalorraquidiano artificial oxigenado.
Recupere as fatias à temperatura fisiológica para manter a viabilidade neuronal.
Depois de obter o cérebro, use um bisturi para remover o cerebelo e a parte interna do cérebro e, em seguida, resfrie a parte central do cérebro em uma solução de corte gelada como antes. Seque o cérebro com papel de filtro e cole-o no estágio de vibrato.
Novamente, fixe um bloco de ágar adicional atrás do cérebro para estabilidade durante o corte. Depois de encaixar o estágio na câmara de corte preenchida com solução de corte de 4 graus Celsius, corte cortes coronais de 320 mícrons através da amígdala. Corte-os ao meio e colete as seções na câmara de interface como antes.