Reprogramação do destino celular de células germinativas de nematóides em neurônios
Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:59 min. • July 8th, 2025
Tome bactérias geneticamente modificadas em um meio de crescimento de nematóides.
A bactéria carrega um plasmídeo com um gene do fator regulador da cromatina do nematóide.
O meio contém um indutor que desencadeia a expressão de uma RNA polimerase transgênica do genoma bacteriano que transcreve o gene do fator regulador da cromatina em um dsRNA.
Adicione larvas de nematóides transgênicos carregando um gene do fator de transcrição indutor de destino do neurônio sob um promotor de choque térmico.
Após o consumo bacteriano, o dsRNA ingerido gera siRNA que regula negativamente a expressão do fator regulador da cromatina, facilitando a reprogramação do destino celular.
Através das células germinativas dos pais, o siRNA é passado para a progênie.
A regulação negativa da expressão do fator regulador da cromatina nas células germinativas da progênie, indicada por um fenótipo vulvar saliente, permite sua reprogramação.
Aplique choque térmico à progênie, ativando o promotor de choque térmico e expressando o fator de transcrição indutor do destino do neurônio que desencadeia a diferenciação neuronal, transformando células germinativas em neurônios.
Os neurônios expressam uma proteína repórter
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