Isolando células imunes de plexos coróides de camundongos

Posicione o cérebro de um camundongo com o lado dorsal para cima.

Sob um microscópio, separe os hemisférios cerebrais. Afaste o córtex e depois o hipocampo para expor os ventrículos laterais e o terceiro ventrículo.

Colete dois plexos coróides laterais. Estas são estruturas cerebrais ricas em células imunológicas que revestem os ventrículos laterais como um longo véu.

Colete o plexo coróide do terceiro ventrículo, que é uma estrutura curta com uma superfície granular.

Desconecte o cerebelo para expor o quarto ventrículo.

Colete o plexo coróide do quarto ventrículo, que é uma longa estrutura globular com uma superfície granular.

Coloque todos os plexos coróides em um tubo com solução salina tamponada para manter a integridade do tecido.

Adicione uma solução de enzimas digestivas e incube com agitação.

A enzima quebra a matriz extracelular e solta as células.

Adicione um tampão adequado para inativar a enzima.

Centrifugue para assentar as células. Rejeitar o sobrenadante e ressuspender as células num novo tampão para análise posterior.

Para começar, posicione o cérebro dissecado de um C57 preto 6 com o lado dorsal do camundongo para cima em uma placa de Petri e coloque a placa abaixo