Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 4:03 min. • July 8th, 2025
Comece com uma placa de vários poços de baixa aderência contendo células-tronco pluripotentes induzidas por humanos em um corpo embrióide ou meio EB.
Centrifugue para assentar as células. Incubar para promover a proliferação e agregação celular, formando corpos embrióides.
Os reguladores da linhagem celular promovem a diferenciação celular em progenitores mieloides.
Colete esses EBs e transfira-os para a borda de uma matriz extracelular ou placa revestida com ECM.
Substitua o meio por um precursor primitivo de macrófagos ou meio de diferenciação PMP e agite suavemente. Incubar para facilitar a fixação dos EBs ao ECM.
Substitua metade do meio e incuba.
Os fatores de crescimento hematopoiéticos levam os progenitores mieloides a se diferenciarem em precursores primitivos de macrófagos, que se separam dos EBs e aparecem no meio.
Colete esses PMPs e gire as células. Ressuspenda-os em um meio de diferenciação da micróglia.
Semeie essas células em uma placa de vários poços revestida com laminina e incuba.
Os PMPs utilizam os fatores de diferenciação e nutrientes, diferenciando-se em células semelhantes à microglia, um tipo de célula imune cerebral.
Para células de revestimento, adicione 1
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