Preparação de órgão vomeronasal de camundongo para seccionamento de vibratomo

Comece com um órgão vomeronasal de camundongo, ou VNO, localizado na base do septo nasal.

Isso contém uma fina camada de tecido que abriga neurônios especiais sensíveis ao olfato que detectam feromônios.

Adicione uma gota de solução fria ao VNO para evitar a secagem.

Separe cada cápsula VNO do tecido ósseo e do osso central.

Remova a cápsula cartilaginosa circundante.

Transfira o VNO para uma superfície fria e adicione uma gota de solução fria para minimizar os danos aos tecidos.

Mergulhe o VNO em agarose derretida, mova-o para remover o excesso de solução e, em seguida, posicione o VNO verticalmente. Coloque no gelo para solidificar a agarose e incorpore o VNO.

Inverta a agarose solidificada e corte-a na forma desejada.

Fixe os blocos em uma placa de amostra.

Agora, corte o tecido usando um vibratome.

Armazene as seções em uma câmara oxigenada contendo uma solução ajustada ao pH para manter a atividade celular para estudos posteriores.

Transferir o VNO para uma pequena placa de Petri sob um estereomicroscópio em uma bolsa de gel de gelo, onde as etapas restantes da dissecção devem ser realizadas. Em seguida, enxágue o VNO em uma pequena quantidade de S2 gelado para evitar que o te