Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:37 min. • July 8th, 2025
Pegue um gânglio da raiz dorsal ou DRG, um aglomerado de neurônios sensoriais, em um meio frio contendo soro para proteger os neurônios durante o processamento subsequente.
Centrifugue e remova o sobrenadante.
Adicione um tampão fosfato contendo enzimas digestivas e incube com agitação leve.
As enzimas dissociam a matriz extracelular, ou MEC, e o tecido DRG, soltando as células.
Adicione um meio contendo soro para inativar as enzimas.
Centrifugue e descarte o sobrenadante.
Ressuspender o DRG e dissociar mecanicamente o tecido usando pipetas de tamanhos progressivamente menores para obter uma suspensão celular.
Coloque as células em camadas sobre um gradiente de densidade de albumina sérica bovina.
centrifuga. Os neurônios se acomodam no fundo, formando uma pelota.
Descarte as camadas que contêm detritos de tecido.
Ressuspenda os neurônios em um meio de cultura.
Adicione os neurônios a uma placa de cultura revestida com ECM e incuba.
Remova o meio e adicione células natural killer ou NK.
Adicione um meio à co-cultura e estude a interação entre essas células.
Colha os DRGs em um tubo cônico de 15 mililitros cheio de 10 mililitros de DMEM suplementado gelado. Em seguida, centrifugue a
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