Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:52 min. • July 8th, 2025
Comece com um poço contendo células progenitoras neurais ou agregados NPC na diferenciação de meio-1 ou DM-1.
Esses NPCs são precursores da linhagem neural gerada a partir de células-tronco pluripotentes induzidas por humanos ou hiPSCs usando DM-1 sob condições controladas.
Transfira os agregados NPC para um inserto de membrana colocado dentro de um poço contendo DM-1 e remova o excesso de mídia.
Mude o meio para DM-2 e incuba.
O DM-2 fornece nutrientes e fatores de diferenciação que promovem a maturação de NPCs em diferentes tipos de células neurais.
NPCs indiferenciados se transformam em corpos embrióides, conhecidos como corpos embrióides sem soro ou SFEBs, pois a mídia não possui soro. Esses EBs se assemelham à morfologia de um cérebro em desenvolvimento.
Transfira o inserto para um poço contendo DM-3.
O DM-3 contém fatores de crescimento essenciais para a manutenção e crescimento dos SFEBs.
Incubar até que os SFEBs atinjam o tamanho desejado.
Após duas semanas de cultura das células, prepare placas de seis poços com inserções de cultura de células de 40 mícrons e 1 mililitro de meio DM1. Incube essas placas por pelo menos quatro horas antes de adicionar as células cultivadas.
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