Registrando correntes de células inteiras com GABA Puffing em uma fatia de cérebro de camundongo

Comece com uma fatia de cérebro cortical pré-frontal segura em um líquido cefalorraquidiano artificial, ou aCSF, na câmara de registro de uma configuração de eletrofisiologia.

Este aCSF contém um bloqueador dos canais de íons de sódio, que inibe os canais de sódio nos neurônios.

Posicione uma micropipeta cheia de ácido gama-aminobutírico, ou GABA, acima de um neurônio pós-sináptico.

Coloque uma micropipeta de gravação cheia de solução iônica com um eletrodo próximo ao mesmo neurônio.

Aplique sucção fraca para criar uma vedação firme com um pequeno pedaço da membrana neuronal.

Em seguida, aplique uma forte sucção para romper a membrana remendada, permitindo o acesso ao interior do neurônio.

Entregue o GABA, um neurotransmissor inibitório, que se liga a um canal de cloreto dependente de ligante nos neurônios pós-sinápticos.

Isso abre o canal e permite que os íons cloreto entrem nos neurônios, gerando uma corrente pós-sináptica inibitória.

Em uma tensão constante, registre a corrente pós-sináptica. Um aumento na corrente pós-sináptica inibitória reflete o papel do GABA na inibição da atividade neuronal.

Transfira uma fatia de cérebro para a câmara de gravação usando uma pipeta Pasteur