Analisando a atividade neuronal evocada por presas em uma larva de peixe-zebra transgênica

Comece com uma câmara de registro de comportamento contendo uma larva de peixe-zebra transgênica anestesiada imobilizada em uma agarose de baixo ponto de fusão.

A região do pretectum do mesencéfalo da larva e o lobo inferior do hipotálamo contêm neurônios modificados que expressam indicadores fluorescentes de cálcio.

Remova a agarose ao redor da cabeça da larva e lave com água para remover qualquer agarose residual.

Coloque um paramécio como presa perto da larva.

Transfira a câmara de registro para um microscópio de fluorescência.

À medida que a presa nada, o olho da larva a detecta e envia um sinal para as regiões do pré-teto e do hipotálamo envolvidas na detecção da presa.

Isso abre canais de cálcio nesses neurônios, permitindo que os íons de cálcio entrem e se liguem aos indicadores de cálcio, levando à emissão de fluorescência.

Registre a imagem de lapso de tempo para detectar a intensidade de fluorescência dos neurônios ao longo do caminho de natação da presa e gere um mapa de cores.

Neste mapa, as pontas das setas representam as trajetórias das presas: as setas pretas não mostram excitação neuronal, enquanto as setas coloridas indicam aumento da excitação neuronal desencadead