Medição dos níveis de glutamato cerebral sob anestesia em leitões neonatais usando um arranjo de microeletrodos

Prenda um leitão neonatal anestesiado a uma estrutura estereotáxica.

Faça uma incisão na linha média para revelar o crânio.

Remova uma parte do crânio e, em seguida, remova a dura-máter para acessar o cérebro.

Fixe uma matriz de microeletrodos, ou MEA, ao quadro estereotáxico.

O MEA consiste em uma haste rígida e locais de registro, incluindo locais sensíveis ao glutamato revestidos com glutamato oxidase e locais sentinela revestidos com uma matriz proteica inativa.

Posicione o MEA verticalmente sobre o local da cirurgia e coloque um eletrodo de pseudo-referência sob o couro cabeludo para uma referência de tensão de linha de base estável.

Insira o MEA na região do cérebro de interesse e inicie a medição.

A glutamato oxidase nos locais de registro converte o glutamato cerebral extracelular em peróxido de hidrogênio, que sofre oxidação eletroquímica na superfície do eletrodo, gerando corrente.

Os locais sentinela medem o ruído de fundo.

Normalize os sinais do local sensível ao glutamato para os sinais do local sentinela para medir os níveis cerebrais de glutamato sob anestesia.

Para começar, crie uma incisão na linha média de 4 a 6 centímetros ao longo do crânio com cuidado para evit