Induzindo Varicosidades Axonais com um Estímulo Micromecânico nos Neurônios

Comece prendendo uma micropipeta com tubo conectado a um micromanipulador.

Conecte a outra extremidade do tubo a uma seringa cheia de tampão de sal por meio de um conector com uma válvula giratória.

Coloque a seringa a uma altura que forneça pressão suficiente para induzir varicosidades nos axônios.

As varicosidades axonais são inchaços semelhantes a contas que ocorrem ao longo do comprimento de um axônio.

Posicione a micropipeta no ângulo desejado em relação à placa de cultura.

Use luz fluorescente do microscópio para alinhar a ponta da micropipeta e abaixe-a perto da superfície da placa de cultura de células contendo tampão de sal.

Agora, ligue a luz transmitida e desligue o filtro fluorescente.

Coloque uma lamínula com neurônios no prato.

Primeiro, concentre-se na micropipeta e ajuste sua posição.

Em seguida, concentre-se na região que contém os neurônios-alvo.

Abra a válvula para aplicar pressão de fluido. Esse estímulo micromecânico induz varicosidades nesses neurônios.

Neste procedimento, insira a pipeta na tampa rosqueada do micromanipulador para mantê-la no lugar. Incline a pipeta em um ângulo de 45 graus com a superfície da placa de cultura de células. Ligue o filtro de fl