Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 4:10 min. • July 8th, 2025
Comece com uma configuração de eletrofisiologia contendo uma fatia de prosencéfalo de camundongo submersa em um aCSF oxigenado.
O aCSF contém um bloqueador de canais iônicos que inibe seletivamente os canais de íons de sódio, impedindo a excitação neuronal induzida por sódio.
Os neurônios corticais expressam proteínas sensoras fluorescentes de detecção de glutamato.
Localize um único botão axonal do neurônio pré-sináptico capaz de liberar glutamato, um neurotransmissor excitatório, na sinapse, uma junção onde ele se conecta com os neurônios pós-sinápticos.
Posicione um eletrodo de estimulação próximo a este botão e aplique correntes despolarizantes.
Isso excita o neurônio pré-sináptico, causando um influxo de íons de cálcio e facilitando a liberação de glutamato.
Inicie o registro da intensidade de fluorescência ao redor do botão selecionado.
O glutamato liberado interage com as proteínas sensoras e receptores nos neurônios pós-sinápticos.
Enquanto isso, ilumine a área selecionada com luz laser, fazendo com que as proteínas do sensor ligadas ao glutamato fiquem fluorescentes; uma intensidade de fluorescência crescente indica liberação de glutamato.
Com o tempo, o glutamato se disso
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