Registro óptico da atividade neuronal em fatias de cérebro coradas com um corante sensível à voltagem

Pegue uma fatia de cérebro de camundongo imobilizado corada com um corante sensível à voltagem ou VSD, moléculas fluorescentes que se integram à membrana neuronal e respondem às mudanças no potencial da membrana.

Coloque a fatia em uma câmara de gravação.

Instale o eletrodo de aterramento para uma referência de tensão de linha de base.

Em seguida, posicione os eletrodos de estimulação e gravação na fatia.

Aplique um pulso elétrico.

O pulso estimula os neurônios, desencadeando a abertura do canal de sódio dependente de voltagem e o influxo de íons de sódio, levando a uma mudança no potencial da membrana.

Isso induz um potencial de ação, medido pelo eletrodo de registro, e altera as propriedades fluorescentes do VSD.

Exponha a fatia do cérebro a um comprimento de onda específico para excitar o VSD e desencadear a emissão de fluorescência.

Após a estimulação, os canais de sódio se fecham enquanto os canais de potássio dependentes de voltagem se abrem, promovendo o efluxo de íons de potássio.

Isso altera o potencial da membrana novamente e, consequentemente, altera a fluorescência do VSD.

Registre a fluorescência em tempo real para representar visualmente a atividade neuronal.

Para ini