Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 6:22 min. • July 8th, 2025
Pegue a cabeça decepada de um camundongo geneticamente modificado. O epitélio olfatório em seu nariz contém neurônios sensoriais olfativos, ou OSNs, com receptores de odor marcados com fluoróforo.
Remova a pele e disseque a cabeça para isolar o septo com o epitélio olfatório anexado.
Separe e prenda o epitélio em uma câmara de registro.
Usando um microscópio de fluorescência, detecte os receptores marcados para atingir o botão dendrítico dos OSNs.
Traga uma pipeta de registro com uma solução intracelular contendo nistatina, um antibiótico perfurante da membrana.
Aplique pressão positiva para evitar o entupimento da pipeta. Insira a pipeta no epitélio e aproxime-se de um OSN.
Mude para pressão negativa, formando uma vedação com a membrana celular. Aplique corrente para manter a membrana no potencial de repouso.
A nistatina perfura a membrana, permitindo a medição das correntes iônicas intracelulares.
Posicione uma pipeta contendo um estimulante de odor perto do OSN. Libere o estimulante, que se liga aos receptores de odor, acionando a abertura do canal iônico para permitir o influxo de íons. Registre os sinais eletrofisiológicos resultantes.
Para este protocolo, tenha camundongos di
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