Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:05 min. • July 8th, 2025
Pegue uma fatia de cérebro de camundongo transfectado imobilizado em uma câmara de registro de eletrofisiologia perfundida com aCSF oxigenado.
Esta fatia contém terminais axônicos dos neurônios talâmicos que expressam canais iônicos sensíveis à luz fundidos a uma proteína fluorescente.
Visualize os axônios fluorescentes do neurônio talâmico e selecione um neurônio piramidal.
Avance uma pipeta de registro contendo um eletrodo em uma solução intracelular em direção ao neurônio selecionado com leve pressão positiva.
A pressão positiva cria uma covinha na membrana neuronal ao entrar em contato.
Libere a pressão para formar uma vedação de alta resistência.
Defina o potencial de membrana para um valor negativo constante.
Aplique um pulso de pressão negativa para romper a membrana, alcançando uma configuração de célula inteira.
Iluminar os terminais axônicos, ativando os canais sensíveis à luz e despolarizando as membranas neuronais, desencadeando potenciais de ação.
Neurotransmissores excitatórios são liberados, ligando-se a receptores no neurônio registrado, causando influxo de cátions.
Registre as correntes pós-sinápticas excitatórias resultantes, indicando uma conexão sináptica direta
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