Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 4:08 min. • July 8th, 2025
Comece perfundindo um líquido cefalorraquidiano artificial aerado ou aCSF sobre uma grade de malha em uma câmara de perfusão.
Transfira uma fatia de cérebro contendo neurônios que expressam proteínas fluorescentes e ancore-a com um dispositivo com fio de platina.
Gire a grade de malha para alinhamento.
Abaixe a sonda multicanal em direção à fatia.
Ajuste o cubo do filtro para visualização de proteínas fluorescentes.
Gire a fatia para alinhar a sonda.
Ajuste a altura da sonda abaixo da superfície do tecido.
Agora, perfunda o aCSF e concentre-se nos neurônios marcados com fluorescência.
Usando uma objetiva de alta potência, concentre-se no tecido e ajuste a luz de excitação.
Use um filtro de luz apropriado para observar a fluorescência nos neurônios.
Ajuste a lente objetiva para criar espaço para a pipeta de remendo e aplique pressão positiva.
Em seguida, posicione a pipeta perto do neurônio para formar uma covinha de membrana.
Finalmente, aplique sucção fraca para criar uma vedação de membrana, seguida de sucção forte para quebrar a membrana e obter registros elétricos do neurônio alvo.
Para colocar a sonda multicanal na lâmina de tecido cerebral ex vivo, perfunda ACSF experimental
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