Registro extracelular da atividade elétrica no sistema nervoso central da drosófila

Coloque um sistema nervoso central seccionado, ou SNC, de uma larva de Drosophila dentro de uma câmara de gravação cheia de solução salina.

O SNC seccionado inclui os gânglios ventrais e os nervos periféricos descendentes.

Coloque um eletrodo de sucção na extremidade posterior do SNC seccionado. Conecte a câmara a um fio de aterramento para reduzir o ruído de fundo.

Aplique pressão negativa para atrair um nervo periférico para o eletrodo e iniciar o registro extracelular da atividade nervosa.

Monitore a geração espontânea de potenciais de ação pelos neurônios ao longo do tempo, denominada frequência de disparo da linha de base, e permita que ela se estabilize.

Adicione um solvente como controle. Registre a atividade para garantir que a frequência de disparo permaneça consistente com a linha de base.

Introduzir o agente de ensaio alvo dissolvido no solvente e registar a frequência de disparo.

Um aumento na frequência exibe o efeito excitatório do agente, enquanto uma diminuição na frequência indica um efeito inibitório.

Para começar, primeiro, puxe o eletrodo da pipeta de vidro dos capilares de vidro borossilicato para uma resistência de 5 a 15 megaohms. Insira o SNC seccionado em u