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Pegue um camundongo geneticamente modificado com uma fibra óptica implantada cirurgicamente e um conjunto de feixe de eletrodos de gravação no hipocampo.
O septo medial do camundongo contém neurônios GABAérgicos que expressam canais iônicos sensíveis à luz, que se projetam para interneurônios no hipocampo.
Conecte um préamplifier ao conector de matriz implantado para aprimorar os sinais elétricos gravados.
Conecte o patch cord à fibra óptica implantada para entrega de luz.
Registre a atividade neural basal sem estimulação de luz.
Forneça pulsos de luz da frequência desejada ao hipocampo, o que ativa os canais iônicos sensíveis à luz dos neurônios GABAérgicos, causando influxo de íons positivos e desencadeando potenciais de ação.
Essa excitação neuronal causa a liberação de neurotransmissores inibitórios nos interneurônios do hipocampo, inibindo-os.
A inibição rítmica dos interneurônios por estimulação luminosa equilibra as entradas excitatórias e inibitórias, sincronizando o disparo de neurônios piramidais e produzindo atividade neural rítmica no hipocampo, conhecida como oscilações.
Verifique a saída de luz do cabo de conexão. Se a taxa de transmissão da fibra implantada for de 50%, certifique-se de que a saída de luz na ponta do patch cord seja de 20 mW. Conecte o pré-amplificador do estágio principal ao conector implantado e conecte o patch cord de fibra óptica à fibra do hipocampo implantada para estimulação optogenética.
Registre o comportamento da linha de base por uma duração apropriada para os parâmetros que estão sendo medidos. Abra o software para controlar o Gerador de Estímulos. Clique em Arquivo, Abrir e selecione o arquivo de protocolo de sua escolha. Clique em Baixar e iniciar para iniciar a estimulação da luz. Observe o controle do ritmo pelos pulsos de luz.
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