Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 4:27 min. • July 8th, 2025
Pegue fatias de cérebro de hipocampo de camundongo contendo neurônios CA3 infectados com um vetor viral recombinante.
O genoma viral expressa um canal ativado por luz marcado com um repórter fluorescente e um microRNA que regula negativamente a expressão de canais de cálcio dependentes de voltagem.
Coloque uma fatia em uma câmara de gravação em condições escuras. Usando um microscópio, identifique os neurônios CA3 fluorescentes.
Aplique um eletrodo de gravação em um neurônio CA1 que recebe entrada de neurônios CA3 infectados. Rompa a membrana para registrar correntes iônicas intracelulares.
Aplique um inibidor para bloquear os receptores de neurotransmissores inibitórios, permitindo apenas sinais excitatórios.
Usando pulsos de luz, estimule os canais ativados por luz nos neurônios CA3 infectados, gerando potenciais de ação.
Em camundongos não infectados, o potencial de ação ativa canais de cálcio dependentes de voltagem, causando um influxo de íons de cálcio que desencadeia a liberação de neurotransmissores. Os neurotransmissores desencadeiam correntes pós-sinápticas excitatórias, ou EPSCs, nos neurônios CA1.
Em camundongos infectados, a redução mediada por microRNA dos canais de c
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