Registrando as respostas auditivas do tronco encefálico em um filhote de rato

Imobilize um filhote de rato anestesiado em um molde de espuma.

Posicione o filhote em uma mesa antivibração dentro de uma sala à prova de som para minimizar a vibração e os artefatos relacionados ao ruído. Coloque uma almofada de aquecimento embaixo para manter a temperatura corporal.

Esterilize a cabeça.

Faça incisões perto das orelhas externas para colocar os eletrodos de referência e terra.

Em seguida, insira o eletrodo de registro sob a pele no vértice do crânio.

Usando um alto-falante conectado a um gerador de som, forneça pulsos sonoros de frequências e intensidades variadas.

As vibrações mecânicas dos pulsos sonoros desviam as projeções das células ciliadas no ouvido interno do rato.

Essa deflexão abre canais iônicos controlados mecanicamente, induzindo um influxo de íons positivos e despolarização das células ciliadas.

As células ciliadas despolarizadas liberam neurotransmissores, que se ligam aos receptores neuronais do ouvido interno, gerando potenciais de ação.

Os potenciais de ação se propagam através do nervo auditivo até o tronco encefálico.

O eletrodo de gravação detecta o sinal, que um processador converte na resposta auditiva do tronco encefálico.

Para iniciar este procedimento, coloque o animal anestesiado em um molde de espuma de polietileno para imobilizar o corpo do animal. Em seguida, coloque o animal em uma mesa antivibração em uma sala de atenuação de som. Mantenha a temperatura corporal do animal em 37,5 graus Celsius com uma almofada de aquecimento.

Em seguida, limpe a área da cabeça com etanol a 70%. Faça uma incisão de 1 a 2 milímetros ventrolateralmente ao pavilhão auricular externo, para colocar o eletrodo de referência ou eletrodo terra. Em seguida, coloque um eletrodo de registro subdérmico sobre o vértice do crânio.

Usando o gerador de funções, gere rajadas de tons calibradas de várias frequências e intensidades. Entregue os estímulos sonoros através de um alto-falante eletrostático localizado a 10 centímetros de distância da cabeça do animal.

Para obter as respostas auditivas do tronco encefálico, os potenciais eliciados pelo som são filtrados, amplificados e calculados usando um processador multifuncional. A gravação do ABR de 40 minutos é monitorada online e armazenada para análise offline.