Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 4:41 min. • July 8th, 2025
Comece com uma fatia de cérebro imobilizada em uma câmara de gravação.
Usando o software controlado por câmera de um microscópio, concentre-se na área alvo
Ligue a luz de excitação e tire várias fotos em diferentes profundidades.
O software detecta as coordenadas das células marcadas com fluorescência.
Agora, posicione a pipeta de remendo cheia de solução contendo o eletrodo de registro na câmara.
Use um software adequado para calibrar os controles de posição.
Sob alta ampliação, recalibre os controles para direcionar com precisão a célula marcada com fluorescência.
Selecione as coordenadas da célula de destino.
Inicie o abaixamento automático da pipeta de remendo.
O computador monitora a resistência através do eletrodo. Aplique uma pressão negativa, um aumento na resistência devido ao contato da pipeta com a membrana celular indica a formação de gigaseal.
Depois disso, o software diminui ainda mais a pressão para perfurar a membrana celular e obter uma configuração de adesivo de célula inteira.
Nesta etapa, coloque uma fatia de cérebro no centro da câmara de gravação. Estabilize a fatia do cérebro com um holdown de fatia ou uma harpa. Para detectar a célula fluorescente, encontre
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