Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:43 min. • July 8th, 2025
Comece com células endoteliais vasculares cerebrais ou CVE em meios de cultura.
As células CVE são células de alta demanda de energia que revestem os vasos sanguíneos do cérebro e são essenciais para a fisiologia cerebral.
Coloque as células em uma placa de cultura de células de fluxo extracelular. Incubar para fixação celular.
Substitua os meios de cultura por meios de ensaio de fluxo extracelular que tenham o pH desejado.
Incubar sem dióxido de carbono para manter o pH.
Em seguida, pegue um cartucho sensor de fluxo extracelular, que inclui sensores e uma placa inferior.
Adicione uma solução de calibração à placa e incube sem dióxido de carbono para hidratar os sensores.
Esses sensores podem medir as mudanças na concentração de oxigênio no ambiente extracelular, indicativas de atividade mitocondrial.
Em seguida, carregue o cartucho em uma máquina bioanalyzer e calibre os sensores.
Substitua a placa inferior pela placa que contém as células.
Meça a função mitocondrial das células CVE.
Após o número apropriado de subculturas, semeie 1,6 x 104 células em 80 microlitros de meio completo por poço em uma placa de cultura de células de fluxo extracelular de 96 poços e coloque a placa em
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