Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:34 min. • July 8th, 2025
Pegue uma fatia coronal do órgão quimiossensorial vomeronasal de um camundongo transgênico que expressa neurônios sensoriais marcados com fluorescência.
O epitélio sensorial contém esses neurônios marcados, que são expostos ao lúmen conectado à cavidade nasal para detectar pistas químicas.
Prenda a fatia em uma câmara de imagem usando uma âncora de fatia.
Transfira a câmara para uma configuração de registro e fluxo de solução extracelular oxigenada para manter a viabilidade do tecido.
Posicione uma pipeta de perfusão perto da fatia para introduzir estímulos químicos e uma pipeta de gravação sobre os neurônios sensoriais.
Usando um microscópio de fluorescência, identifique os neurônios marcados.
Aplique pressão positiva para evitar o entupimento da pipeta e aproxime-se de um neurônio até que uma covinha se forme na membrana.
Mude para pressão negativa, puxando a membrana para dentro da pipeta.
Aplique sucção para romper a membrana e estabelecer continuidade com o citoplasma, chamada de patch clamp de célula inteira, permitindo a introdução de estímulos químicos e registrando os sinais eletrofisiológicos resultantes.
Transfira uma fatia VNO para a câmara de imagem e fixe a posição da
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