Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 7:22 min. • July 8th, 2025
Pegue segmentos de uma artéria cerebral posterior de camundongo.
Incubar com uma solução enzimática para degradar a matriz tecidual, soltando as células.
Substitua a solução por um tampão e transfira um segmento para uma câmara de gravação.
Dissocie mecanicamente o tecido conjuntivo e as camadas de células musculares lisas, isolando o tubo endotelial subjacente.
Prenda o tubo, remova as camadas dissociadas e adicione um tampão fisiológico.
Colocar a câmara num sistema de registo com fluxo tampão contínuo.
Introduza um indicador fluorescente de cálcio que entra nas células endoteliais e, em seguida, insira um eletrodo de registro em uma célula.
Administre um medicamento que desencadeie o influxo de íons cálcio e induza a sinalização a jusante para liberação de cálcio do retículo endoplasmático.
O indicador se liga ao cálcio e, após a excitação, emite fluorescência.
O aumento do cálcio ativa os canais de potássio dependentes de cálcio, causando escoamento de potássio e alterando o potencial de membrana.
Registre simultaneamente as alterações no cálcio intracelular por meio do sinal fluorescente e do potencial de membrana usando o eletrodo.
Neste procedimento, prepare o aparelho de tr
Veja a transcrição completa e aceda a milhares de vídeos científicos