Registro de eletroencefalografia em um modelo de epilepsia focal em ratos

Pegue um rato anestesiado com epilepsia focal, caracterizada por atividade elétrica cerebral anormal.

Prenda o rato em um aparelho estereotáxico e administre anestesia através de um cone nasal.

Remova completamente o pelo da cabeça para evitar interferência de sinal durante o eletroencefalograma ou gravação de EEG.

Limpe a pele com álcool e coloque cotonetes salinos para aumentar a condutância elétrica.

Aplique pasta de EEG em cada eletrodo de uma mini-tampa de EEG multicanal para garantir a condutividade ideal entre os eletrodos e a pele.

Fixe a mini-touca no couro cabeludo.

Posicione os eletrodos de aterramento e de referência nas orelhas.

Conecte a mini-tampa ao amplificador. Visualize os sinais de EEG para identificar eletrodos fracamente conectados e melhorar sua conectividade.

Administre um sedativo e interrompa o fluxo anestésico para minimizar sua interferência na atividade cerebral.

Registre o EEG e identifique os eventos anormais de atividade elétrica.

Marque a posição da mini-tampa na pele para correlação espacial durante as imagens cerebrais subsequentes.

Para iniciar este procedimento, misture a pasta de eletrodo de EEG com solução de NaCl a 0,9%. Adicione uma gota de azul de metileno para ajudar a visualizar a pasta do eletrodo dentro dos eletrodos e na pele. Em seguida, coloque a pasta misturada em uma seringa e certifique-se de que não haja bolhas de ar nela. Em seguida, encha todos os 32 eletrodos com a pasta do fundo sem introduzir bolhas de ar.

Como parte do procedimento de preparação para o rato, apare a cabeça do rato. Depois, reduza o isoflurano para 2%. Em seguida, coloque o rato na almofada de aquecimento do aparelho estereotáxico. Fixe os canais auditivos com as barras auriculares e prenda o cone do nariz para o fornecimento de anestésico. Em seguida, aplique pomada oftálmica nos olhos do animal.

Em seguida, raspe a cabeça e esfregue a pele com álcool isopropílico a 90% para estimular os vasos sanguíneos e remover a gordura. Em seguida, coloque um cotonete salino no couro cabeludo e cubra-o completamente para manter uma boa condutância da pele, até que a minicapa de EEG esteja pronta para ser colocada. Conecte as sondas de respiração, temperatura e eletrocardiograma de três derivações ao corpo do rato para monitorar continuamente sua fisiologia durante o procedimento de gravação.

Neste procedimento, remova o cotonete salino do couro cabeludo do rato e coloque a mini-touca de EEG preparada em sua pele. Fixe a mini-tampa com elásticos. Aplique uma camada de pasta de eletrodo de alta condutância nos eletrodos de aterramento e de referência. Em seguida, coloque-os nas respectivas orelhas. Em seguida, conecte a minitampa do EEG ao amplificador. Veja uma prévia dos traços de EEG e verifique o desempenho de todos os eletrodos.

Em seguida, administre Dexdomitor a 0,25 miligramas por quilograma no rato por via intraperitoneal e reduza imediatamente a taxa de isoflurano para 0%. Se a frequência respiratória não estiver dentro da faixa de 30 a 60 BPM, aumente a taxa de isoflurano suavemente no máximo 1%. Agora, comece o registro do EEG e verifique a existência de atividade paroxística nos traços de EEG. Após a gravação, marque as posições dos três círculos salientes da mini-touca de EEG na parte superior da pele, inserindo uma caneta colorida dentro deles antes que a mini-touca de EEG seja removida. Tire uma foto da cabeça do rato com os pontos de referência.