Registro intracelular in vivo da sensibilidade espectral de células fotorreceptoras em uma borboleta

Comece com uma borboleta imobilizada em uma plataforma.

Sob um microscópio de dissecação, insira um eletrodo de referência através do aparelho bucal para alcançar a cabeça e fixe o eletrodo na plataforma.

Faça uma pequena incisão na córnea e sele-a para evitar o ressecamento.

Usando uma breve iluminação sob um estereoscópio, posicione um eletrodo de registro preenchido com uma solução iônica acima da córnea.

Em seguida, abaixe o eletrodo na córnea usando um micromanipulador para acessar a célula fotorreceptora.

Uma mudança significativa de tensão através da membrana indica o contato do eletrodo com a célula.

Adapte o inseto ao escuro desligando as fontes de luz externas.

Inicie flashes de luz com um gerador de pulso e direcione um cabo de fibra óptica em direção ao olho.

Ajuste a posição do eletrodo e do cabo de fibra óptica até obter uma resposta despolarizante.

Registre as respostas da célula à luz branca e filtros coloridos para avaliar sua sensibilidade a diferentes comprimentos de onda de luz.

Para preparar a amostra, sob o microscópio, fixe uma borboleta individual dentro de um pequeno tubo de plástico com cera quente, de modo que a cabeça fique imóvel e saliente de uma extre