Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 4:47 min. • July 8th, 2025
Comece com tubos contendo voltas cocleares de camundongo pré-tratadas com um agente permeabilizante e um agente bloqueador que evitam interações inespecíficas.
Cada volta detecta diferentes frequências sonoras e contém células ciliadas que convertem o som em sinais elétricos. Esses sinais são transmitidos por meio de neurotransmissores em sinapses de fita para o nervo auditivo.
Remova a solução e adicione anticorpos primários que interagem com proteínas no cabelo e nas células nervosas nas sinapses da fita e, em seguida, lave.
Incubar com anticorpos secundários marcados com fluoróforos vermelhos e verdes, que se ligam aos seus anticorpos primários.
Lave para remover anticorpos secundários não ligados.
Coloque a amostra em uma lâmina de vidro com um meio de montagem contendo corante nuclear para manchar os núcleos de azul.
Monte a lamínula. Seque-o e use um microscópio confocal para obter imagens de cada segmento em várias profundidades.
As sinapses de fita aparecem como pontos vermelhos e verdes posicionados de perto.
Conte esses pontos funcionais em cada turno para correlacionar sua resposta à frequência do som.
Após a dissecção, coloque cada volta coclear em tubos de centrífuga i
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