Implantando um feixe de eletrodos e fibra óptica no hipocampo do camundongo

Pegue um camundongo anestesiado imobilizado com o crânio exposto.

Faça furos rostrais à sutura coronal e acima do cerebelo.

Insira parafusos de aço inoxidável nos locais perfurados rostral à sutura coronal para estabilização do implante.

Insira os parafusos de aterramento e de referência acima do cerebelo para minimizar o ruído elétrico.

Cubra esses parafusos com cimento para evitar artefatos musculares durante as gravações. Prenda os outros parafusos com cimento.

Faça furos no crânio, expondo o tecido do hipocampo. Aplique solução salina para manter a hidratação dos tecidos.

Abaixe a fibra óptica e o conjunto de eletrodos através dos orifícios no hipocampo para estimulação óptica e registro de atividade neural direcionada.

Aplique cera quente ao redor do local de implantação para proteger o tecido.

Envolva o implante e o crânio em cimento para estabilizá-los.

Solde os fios terra e de referência ao conjunto de eletrodos para garantir uma conexão elétrica estável.

Cubra os fios com cimento.

Retorne o mouse à gaiola para recuperação.

Comece fazendo quatro furos de 0,8 milímetros de diâmetro no crânio limpo do animal anestesiado. Faça dois furos rostral à sutura coronal e dois acima do cerebelo. Em seguida, coloque parafusos ósseos de aço inoxidável para aterramento e estabilização do implante. Posicione o parafuso de aterramento conectado a um fio de cobre acima do cerebelo. Cubra o parafuso de aterramento completamente com cimento para evitar artefatos musculares durante os registros eletrofisiológicos.

Construa um anel de cimento conectando todos os parafusos. Realize uma craniotomia acima do local de implantação. Em seguida, aplique aproximadamente 1 microlitro de solução salina estéril na superfície do tecido cerebral. Use o stereotax para abaixar lentamente o feixe de fios na craniotomia. Em seguida, aplique aproximadamente 5 microlitros de cera líquida quente acima do local de implantação para proteger o tecido cerebral. Aplique cimento ao redor da matriz de arame e cubra o crânio com cimento. Aplique uma gota de fluxo no fio terra pré-soldado ou no fio pré-soldado conectado ao parafuso de aterramento e funda os fios usando uma máquina de solda. Por fim, cubra todo o fio terra com cimento.