Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 3:45 min. • July 8th, 2025
Comece com uma antena contendo uma matriz de silício que tenha vários canais pequenos conectados às portas de entrada e saída.
Injete a proteína de teste com atividade repulsiva através da entrada para preencher os canais.
Incube para permitir a aderência da proteína na área do canal, formando zonas de proteína de teste e, em seguida, lave.
Remova a matriz, cubra a área revestida com uma proteína de controle que possua atividade atrativa e incuba.
Isso facilita a aderência da proteína de controle às áreas vazias entre as zonas de proteína de teste, criando zonas de proteína de controle com um padrão listrado alternado e, em seguida, lave.
Adicione laminina para revestir a área listrada e depois lave.
Semeie a área revestida com uma suspensão unicelular de neurônios do hipocampo e incuba.
Na zona da proteína de teste, os neurônios interagem com as proteínas, desencadeando sinais que fazem com que os neurônios se repelam, inibindo sua fixação.
Em contraste, as interações neurônio-proteína na zona da proteína de controle promovem a ligação neuronal, apoiando seu crescimento e extensão do axônio.
Prepare as proteínas recombinantes marcadas com fluorescência em PBS. Faça 25 microlitros
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