Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:19 min. • July 8th, 2025
Fixe uma inserção de cultura de três compartimentos em um prato revestido de polímero para fixação das células.
Inverta o prato, marque o compartimento do meio e reoriente-o. Adicione um meio contendo interneurônios a este compartimento.
Adicione um meio contendo células endoteliais periventriculares humanas, ou PVECs, células dos vasos cerebrais, a um dos compartimentos externos.
Em outro compartimento externo, adicione um meio contendo células endoteliais não periventriculares como controle.
Adicione um meio de co-cultura ao prato para evitar a secagem do polímero. Incubar para adesão celular.
Desmonte a inserção, criando manchas retangulares de células com pequenos espaços livres de células entre cada tipo de célula.
Refresque com o meio de co-cultura e incuba.
As células endoteliais fazem com que os interneurônios migrem para espaços livres de células.
Enquanto isso, os PVECs liberam atrativos químicos que aumentam a migração de interneurônios em direção ao adesivo contendo PVEC.
A maior migração de interneurônios em direção ao adesivo de PVEC do que o patch da célula de controle confirma a resposta do interneurônio a pistas quimioatrativas dos PVECs.
Para realizar o ensaio de
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