Desenvolvimento de um modelo in vitro de infecção pelo vírus Zika em organoides cerebrais

Pegue uma placa multipoços contendo organoides cerebrais humanos em um meio de indução neural.

Os organoides contêm células-tronco, células gliais radiais, células progenitoras neurais ou NPCs e neurônios dispostos em um padrão radial chamado roseta, imitando o cérebro em desenvolvimento.

Remova o meio e lave os organoides com um tampão.

Adicione o vírus Zika suspenso em um tampão aos poços de teste e apenas tampão aos poços de controle.

Incubar, permitindo que o vírus se ligue a seus receptores nos NPCs e se torne internalizado.

Lave para remover vírus não internalizados, adicione um novo meio de indução neural e incuba.

Os vírus internalizados usam a maquinaria da célula hospedeira para formar novas partículas virais.

A multiplicação viral desencadeia uma resposta de estresse celular que induz a apoptose, reduzindo o número de NPCs disponíveis para o desenvolvimento de organoides.

Com o tempo, os organoides infectados exibem tamanho reduzido e morfologia interrompida, refletindo o desenvolvimento anormal do cérebro em humanos infectados pelo vírus Zika.

Leve a solução salina balanceada 1X da Earle, 1X PBS e o meio de indução neural a 37 graus Celsius em banho-maria. Em seguida, d