Lesão mecânica de nervos segmentares de larvas de Drosophila para induzir neurodegeneração

Pegue as larvas de Drosophila de terceiro ínstar e anestesieste-as com dióxido de carbono.

Sob um microscópio, posicione as larvas com a superfície ventral voltada para cima para visualizar os nervos segmentares.

Esses nervos contêm neurônios motores que inervam os músculos da parede do corpo e controlam o movimento larval.

Os terminais axônicos desses neurônios se conectam às fibras musculares para formar junções neuromusculares ou NMJs.

Os neurônios liberam neurotransmissores que se ligam a receptores nas fibras musculares, causando influxo de íons e desencadeando a transmissão do sinal.

Usando uma pinça, aperte a cutícula ventral para ferir os nervos segmentares, inibindo assim o movimento.

Coloque as larvas feridas em um prato de ágar com comida larval para garantir a sobrevivência.

Coloque o prato em um prato, cubra-o com uma toalha de papel úmida para manter a umidade e guarde-o em um recipiente para permitir a recuperação larval.

Com o tempo, a lesão leva à morte do neurônio motor, conhecida como neurodegeneração, que interrompe as JNMs.

Coloque cada larva em um aparelho anestésico de CO₂. Sob um microscópio de dissecação, role cuidadosamente cada larva em seu lado dorsal pa