Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:24 min. • July 8th, 2025
Comece com um rato anestesiado e faça uma incisão acima da órbita do olho.
Disseque o tecido subcutâneo para acessar a cavidade orbital, que contém o nervo óptico.
Sob um microscópio, disseque a conjuntiva, seguida pelo tecido conjuntivo subjacente.
Em seguida, retraia os músculos circundantes e a glândula. Corte as camadas protetoras para expor o nervo óptico.
O nervo óptico consiste em fibras nervosas mielinizadas ricas em lipídios que transmitem sinais elétricos.
Em seguida, pegue uma micropipeta de vidro pré-montada cheia de lisolecitina, um agente desregulador de lipídios e um corante para rastreamento visual.
Insira a micropipeta no nervo óptico exposto e injete a lisolecitina.
Suture a incisão na pele e aplique pomada antibiótica para prevenir infecções e, em seguida, permita que o rato se recupere.
No nervo óptico, a lisolecitina injetada interrompe a integridade da bainha de mielina que envolve as fibras nervosas.
Isso resulta em desmielinização localizada, reduzindo a transmissão do sinal através do nervo óptico.
Prepare o animal para a cirurgia conforme descrito anteriormente e faça uma incisão na pele de 1 a 1,5 centímetro acima da órbita de cada olho. Com uma tesoura de íris fina, abra o tecido subcutâneo e acesse a cavidade orbital. Em seguida, sob um estereoscópio, abra a conjuntiva e a cápsula de Tenon anterior.
Em seguida, retraia os músculos extraoculares e as glândulas lacrimais intraorbitais para expor cerca de 3 milímetros do nervo óptico. Ao redor do nervo óptico, use uma lâmina oftálmica para abrir as camadas da dura-máter e da aracnóide longitudinalmente e, em seguida, insira uma micropipeta de vidro conectada a uma seringa de Hamilton no nervo 2 milímetros posterior ao globo.
Durante 30 segundos, injete um bolus de lisolecitina com corante. Para concluir o procedimento, suture a incisão na pele, aplique pomada antibiótica para prevenir infecções, mova o animal para uma almofada de aquecimento e monitore-o até que ele se recupere.