Estabelecendo uma infecção ativa pelo HIV em um modelo de rato

Comece com um rato anestesiado, desinfete sua cabeça raspada e prenda-o em um aparelho estereotáxico.

Faça uma incisão na linha média para expor o crânio.

Marque duas posições no crânio e faça pequenos furos.

Anexe uma seringa com vírus quiméricos contendo RNA do HIV ecotrópico dentro de um vetor lentiviral ao aparelho estereotáxico.

Insira a agulha no orifício, visando as células do córtex cerebral, incluindo a microglia, as células imunológicas do cérebro.

Injete lentamente os vírus para sua distribuição uniforme no córtex.

Após a injeção, suturar a incisão, desinfetar a área e permitir que o rato se recupere.

O vírus injetado interage com os receptores das células cerebrais, se funde e libera o RNA do HIV no citoplasma.

O RNA é transcrito reversamente em DNA e se integra ao DNA da célula.

A célula infectada expressa os componentes virais, produzindo novo RNA e proteínas.

Estes se reúnem e liberam como novos vírus, que aumentam a carga viral no cérebro, estabelecendo uma infecção ativa pelo HIV.

Para a injeção de EcoHIV EGFP, após confirmar a falta de resposta ao reflexo pedal, raspe o cabelo da região do cérebro e esterilize a pele exposta 2 vezes com etanol a 70% e um esfoliant