JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurociência
0 vistas • 2:30 min • July 8th, 2025
Pegue um rato anestesiado colocado em uma almofada de aquecimento com temperatura retal regulada para manter a temperatura corporal.
Remova o pelo e desinfete o local da cirurgia.
Em seguida, prenda o rato em decúbito ventral em uma unidade estereotáxica.
Faça uma incisão cirúrgica na linha média. Em seguida, exponha a área entre os pontos de referência do crânio.
Posicione o laser adequadamente acima do hemisfério direito para atingir o córtex motor.
Administre pulsos de luz de alta energia e comprimento de onda mais longos na área exposta do crânio, penetrando profundamente no córtex motor.
O tecido absorve esses pulsos, causando aquecimento localizado e danos celulares, induzindo lesão cerebral.
Após a exposição ao laser, remova o rato da unidade estereotáxica.
Suturar a incisão cirúrgica e retornar o rato à sua gaiola.
Permita que ele se recupere. O modelo de rato com lesão cerebral induzida por laser pode ser usado para análise neurológica.
Para realizar uma lesão cerebral induzida por laser, primeiro, designe vinte ratos Sprague Dawley de 300 a 350 gramas para o grupo do laser. Depois de confirmar a falta de resposta ao reflexo de abstinência, coloque um rato em uma almofada de aquecimento com temperatura retal regulada e use um barbeador para remover pêlos suficientes do local da lesão, com uma margem livre de pêlos de aproximadamente dois centímetros ao redor da incisão. Desinfete a pele exposta com etanol a 70% e coloque o rato em decúbito ventral em um suporte de cabeça estereotáxico.
Faça uma incisão de três centímetros para permitir a reflexão lateral do couro cabeludo para expor a área entre bregma e lambda. Segurando um laser Nd:YAG com comprimento de onda de pico de 1.064 nanômetros a uma distância de dois milímetros do crânio, administre 50 joules vezes 10 pontos, com duração de pulso de um segundo, na área exposta do crânio acima do hemisfério direito. Após a aplicação da lesão a laser, remova o rato do dispositivo e feche o couro cabeludo com suturas cirúrgicas de seda 3-0. Em seguida, coloque o rato em sua gaiola com monitoramento até a decúbito total.