Um modelo in vitro de lesão por estiramento em neurônios derivados de células-tronco pluripotentes induzidas por humanos

Comece com uma placa sem fundo de vários poços presa a uma membrana de silicone. A membrana é revestida com um biopolímero para facilitar a adesão celular.

Introduza neurônios derivados de células-tronco pluripotentes induzidas por humanos, ou hiPSCNs, suspensos em um meio nos poços. O meio é suplementado com matriz extracelular, ou proteínas ECM para aumentar a adesão celular.

Incubar a placa, permitindo que as células adiram às proteínas ECM e ao biopolímero, promovendo interação uniforme com a superfície da membrana.

Em seguida, prenda a placa no estágio de um dispositivo de lesão.

Usando o dispositivo, aplique recuo na membrana para gerar estresse mecânico controlado nos neurônios.

O estresse interrompe o citoesqueleto, o que causa a degeneração de saliências celulares denominadas neuritos e a formação de pequenos inchaços ao longo dos neuritos.

O estresse também danifica a integridade da membrana celular, resultando na morte celular.

Os hiPSCNs exibindo um fenótipo de lesão por estiramento estão agora prontos para análise.

Para esticar a placa, altere o campo "File name" e "File path" no instrumento virtual "Position Tracking" para um nome de arquivo exclusivo e clique na seta