JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurociência
0 vistas • 2:26 min • July 8th, 2025
Comece com uma solução de resiniferatoxina (RTX), um agonista de alta afinidade do receptor TRPV1 - canais iônicos sensíveis à dor expressos em neurônios sensoriais.
Pegue um camundongo adulto anestesiado e administre RTX por via intraperitoneal.
A droga entra na circulação sistêmica e atinge os gânglios da raiz dorsal (DRG), um aglomerado de corpos celulares de neurônios sensoriais localizados perto da medula espinhal.
O RTX atravessa a barreira hematonervosa e interage com neurônios sensoriais de pequeno diâmetro no DRG que expressam abundantemente o TRPV1.
A ligação do RTX ao TRPV1 ativa os receptores, induzindo um influxo maciço de íons de cálcio nos neurônios.
O cálcio intracelular ativa enzimas que degradam os fosfolipídios, proteínas celulares e DNA da membrana celular, levando à morte neuronal.
Posteriormente, as fibras nervosas intraepidérmicas (IENFs), os terminais periféricos dos neurônios sensoriais de pequeno diâmetro que inervam a pele, começam a degenerar.
Essa degeneração dos IENFs resulta na perda de informações sensoriais da pele, estabelecendo assim um modelo de neuropatia de pequenas fibras.
Para começar, coloque equipamento de proteção individual e tome as devidas precauções ao fazer a solução de estoque de resiniferatoxina ou RTX. Diluir uma alíquota de 600 microlitros em solução salina para o experimento e dividir o restante em alíquotas de 12 microlitros para armazenamento. Para camundongos de teste, use camundongos ICR machos adultos de oito semanas, pesando entre 35 e 40 gramas. Administre uma dose única de solução RTX por via intraperitoneal com uma seringa de microinjeção. Em seguida, injete um segundo grupo de camundongos com um volume igual de veículo para servir como controle. Depois de fazer todas as injeções, coloque os ratos em suas gaiolas domésticas e certifique-se de que eles tenham acesso improvisado a comida e água.