Modelagem da degeneração e regeneração da retina em peixe-zebra usando uma lesão focal a laser

Comece com um peixe-zebra adulto anestesiado.

Transfira o peixe para um suporte de alfinete de silicone e aplique uma camada de polímero sintético para lubrificar o olho.

Em seguida, posicione uma lente de laser na frente do olho para focar um feixe de mira de laser na retina.

Direcione o laser para o olho do peixe-zebra, induzindo lesões na retina.

O laser induz danos térmicos e a morte das células fotorreceptoras da retina, iniciando um processo degenerativo que progride ao longo de dias e se estende do epitélio pigmentado da retina até a camada plexiforme externa.

Em resposta, as células da glia de Muller (MG) sofrem gliose reativa, tornando-se hipertróficas e proliferativas.

Essas células então se diferenciam em progenitores de células-tronco.

As células progenitoras migram gradualmente para o local da lesão e, guiadas por pistas espaciais e temporais do microambiente, diferenciam-se em tipos de células retinianas maduras ao longo de vários dias, facilitando assim a regeneração da estrutura da retina.

Prepare uma solução estoque de anestésico dissolvendo 400 miligramas de pó de tricaína em 97,9 mililitros de água do tanque e 2,1 mililitros de TBS de um molar. Ajuste para pH 7,0