Caracterização do espaço extracelular em uma fatia cerebral usando microeletrodos íon-seletivos e iontoforese

Comece com uma câmara de gravação contendo uma fatia de cérebro espessa e segura imersa em líquido cefalorraquidiano artificial ou aCSF.

Essa fatia do cérebro inclui fluido intersticial e matriz extracelular, formando o espaço extracelular interconectado que envolve as células cerebrais.

Mergulhe o microeletrodo íon-seletivo de canal duplo e o microeletrodo de iontoforese no aCSF.

O microeletrodo íon-seletivo de canal duplo apresenta um canal de detecção para íons tetrametilamônio ou TMA e um canal de referência, enquanto o microeletrodo de iontoforese contém uma solução de TMA.

O eletrodo de iontoforese libera íons TMA, que se difundem em direção ao microeletrodo seletivo de íons.

O canal de detecção detecta esses íons TMA e gera um sinal elétrico. Registre isso como uma linha de base.

Insira os dois eletrodos na fatia do cérebro, mantendo-os ligeiramente separados.

À medida que os íons TMA se difundem pelo espaço extracelular, eles atingem o microeletrodo seletivo de íons.

Grave novamente o sinal e compare-o com a linha de base para analisar as propriedades do espaço extracelular, como a fração de volume e o grau de torção.

Coloque uma fatia de cérebro de 400 micrômetros de espes