Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 2:00 min. • July 8th, 2025
Pegue um camundongo anestesiado com micro-feridas na almofada do pé que expõem o estrato basal, a camada mais profunda da epiderme.
Esta camada contém fibras nervosas periféricas conectadas aos gânglios da raiz dorsal, ou DRG, perto da medula espinhal.
Aplique um inóculo do vírus da pseudo-raiva, que tem como alvo o sistema nervoso, na ferida e esfregue-o com uma haste de agulha para aumentar a adsorção.
O vírus se liga aos receptores da superfície celular, o que permite que o vírus entre e comece a se replicar.
As partículas virais se espalham para as células próximas e entram nos nervos periféricos.
O vírus então viaja para o DRG e se espalha pela medula espinhal até o cérebro, infectando os neurônios.
Os neurônios infectados liberam DAMPs, ativando a micróglia residente, que secreta citocinas e quimiocinas para atrair macrófagos e neutrófilos.
Essas células imunes liberam espécies reativas de oxigênio e enzimas proteolíticas que danificam os neurônios, levando à neuroinflamação.
Aplique topicamente 20 microlitros do título apropriado de inóculo viral na almofada do pé desgastada. Realizar inoculações simuladas com meio apenas nas patas desgastadas dos animais de controle em paralelo. Após cada aplicação, esfregue suavemente a almofada do pé 10 vezes com a haste de uma agulha para facilitar a absorção do vírus a cada 10 minutos por 30 minutos. Quando a pata desgastada estiver seca, permitir que os ratinhos recuperem com monitorização até à decúbito esternal antes de colocar os animais em gaiolas individuais para acompanhamento clínico e amostragem.