JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurociência
0 vistas • 1:56 min • July 8th, 2025
Comece com uma seringa contendo células T-helper ou Th17 capazes de reconhecer uma proteína aquaporina-4 de astrócitos no SNC, incluindo a medula espinhal, que desempenha um papel na transmissão de sinais para o cérebro.
Injete essas células Th17 na veia da cauda de um camundongo contido. As células entram na corrente sanguínea e circulam por todo o corpo.
Simultaneamente, administrar por via intraperitoneal uma toxina bacteriana derivada da Bordetella pertussis.
A toxina perturba a barreira endotelial dos vasos sanguíneos e permite que as células Th17 se infiltrem na medula espinhal.
As células Th17 infiltradas interagem com os astrócitos que expressam a aquaporina-4 e são ativadas.
Essas células ativadas liberam citocinas pró-inflamatórias, o que causa a infiltração de células imunes mononucleares, incluindo macrófagos.
Os macrófagos liberam moléculas inflamatórias que danificam a bainha de mielina das fibras nervosas circundantes.
Essa desmielinização interrompe a transmissão do sinal nervoso, levando à rigidez da cauda e ao movimento restrito dos membros posteriores, indicando o início da paralisia.
Dentro de uma hora após a coleta, transfira as células para uma seringa de 1 mililitro e entregue 200 microlitros de células a cada animal receptor por via intravenosa através da veia da cauda. Em seguida, injetar cada camundongo por via intraperitoneal imediatamente e, dois dias depois, com 200 nanogramas de toxina B. pertussis diluída em 200 microlitros de PBS.