Imagens de lapso de tempo para monitorar a disseminação transcelular de proteínas semelhantes a príons em nematóides transgênicos

Tome nematóides transgênicos que são mantidos no mesmo estágio de desenvolvimento.

As células musculares da parede corporal desses nematóides expressam proteínas semelhantes a príons, que são marcadas com uma proteína fluorescente vermelha e localizadas dentro de vesículas ácidas.

As proteínas semelhantes a príons são mal dobradas, agregando proteínas associadas a doenças neurodegenerativas.

Em seguida, transfira os nematóides para uma almofada de agarose contendo nanopartículas poliméricas e uma solução anestésica.

Os efeitos combinados das nanopartículas e da solução anestésica imobilizam os nematóides na almofada de agarose.

Coloque uma lamínula sobre a almofada de agarose e feche-a.

Agora, posicione o conjunto da almofada de agarose com os nematóides sob um microscópio confocal e defina os parâmetros de imagem apropriados.

Adquira imagens de lapso de tempo das proteínas marcadas com fluorescência dentro dos nematóides para monitorar o transporte vesicular das proteínas semelhantes a príons dentro e entre as células musculares da parede corporal.

Depois de preparar linhas transgênicas sincronizadas de controle e domínio priônico de C. elegans e almofadas de agarose a 10% de acor