Uma injeção de vetor viral na substância negra do rato para modelagem de doenças neurodegenerativas

Prenda um rato anestesiado em um quadro estereotáxico.

Desinfete o couro cabeludo e faça uma incisão na linha média do crânio para expor o crânio.

Identifique o bregma e o lambda, dois pontos de referência no crânio, para determinar o local da injeção.

Prepare uma seringa para microinjeção contendo uma suspensão de vetor viral.

O vetor viral carrega um transgene que codifica a alfa-sinucleína, uma proteína que sofre desdobramento e agregação nos neurônios da substância negra em doenças neurodegenerativas.

Posicione a seringa no instrumento estereotáxico conectado a uma bomba de microinjeção.

Crie um orifício de rebarba no local da injeção, evitando lesões cerebrais.

Penetre na dura-máter com uma agulha e limpe qualquer sangue com tecido estéril.

Insira a agulha de microinjeção através do orifício da rebarba para alcançar a substância negra.

Injete lentamente a suspensão viral, garantindo uma distribuição uniforme.

Faça uma breve pausa para evitar o refluxo e, em seguida, retire lentamente a agulha.

Suturar a incisão.

O modelo agora está pronto para uma análise mais aprofundada.

Comece anestesiando adequadamente uma rata Wistar fêmea de oito semanas de idade, de acordo com os protoc