Enciclopédia de Experimentos da JoVE
Neurociência
0 visualizações • 1:58 min. • July 8th, 2025
Comece com uma placa multipoços contendo uma barreira hematoencefálica in vitro ou modelo BBB.
Este modelo consiste em células endoteliais aderidas ao lado superior ou sanguíneo e astrócitos no lado inferior ou cerebral de uma inserção de membrana revestida com matriz.
Adicione isotiocianato de fluoresceína ou FITC, um corante fluorescente, à câmara superior de um poço de controle.
Por outro lado, adicione ferritina carregada com FITC, ou ferritina FITC, à câmara superior de um poço de amostra e depois incube.
No poço de controle, o FITC livre permanece confinado à câmara superior, com travessia mínima pela BHE.
Enquanto isso, no poço da amostra, os complexos FITC-ferritina se ligam a receptores nas células endoteliais.
Isso permite a internalização mediada por receptor e o transporte para a câmara inferior.
Em seguida, colete regularmente o meio das câmaras inferiores de ambos os poços e meça a intensidade da fluorescência.
O controle exibe menor fluorescência, enquanto a amostra exibe maior fluorescência, confirmando a permeabilidade diferencial da BHE para FITC e FITC-ferritina.
Para medir o fluxo de ferritina FITC através do sistema de barreira hematoencefálica, adicione ferrit
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