Realização de cirurgia de hemissecção da medula espinhal torácica em ratos

Prenda um rato anestesiado com um tronco dorsal raspado em uma estrutura estereotáxica.

Desinfete a área raspada e cubra o rato com uma cortina.

Faça uma incisão e retraia a pele e a gordura subcutânea sobre as vértebras torácicas T6 a T10.

Separe os músculos paravertebrais para expor as vértebras T7 a T9.

Corte bilateralmente as articulações facetárias nas vértebras T7 e T8.

Corte superficialmente o tecido conjuntivo dorsal entre as vértebras T8 e T9.

Remova o processo espinhoso T8 e gire levemente sua lâmina.

Corte a lâmina em ambos os lados, expondo a medula espinhal.

Aplique anestésico e remova a dura-máter que cobre o segmento espinhal T8.

Identifique a linha média da medula espinhal e corte para um lado, sem danificar a artéria espinhal anterior.

Essa hemissecção interrompe os tratos neurais de um lado.

Coloque uma esponja absorvente embebida em solução salina para controlar o sangramento.

Suture a incisão e permita que o rato se recupere.

Depois de confirmar a falta de resposta ao beliscão do dedo do pé em um rato adulto anestesiado, faça uma incisão de 2,5 centímetros na pele raspada que cobre as vértebras T6 a T10 e use uma tesoura romba para retrair a pele e a gordura superficial. Use uma tesoura de dissecção romba e um afastador auto-retentor para separar os músculos paravertebrais, inserindo-os na face dorsal das vértebras T7 a T9, e use pinças finas e aplicadores com ponta de algodão para desbridar e limpar qualquer tecido remanescente para expor os processos espinhosos e a lâmina vertebral.

Coloque o rato sob um estereomicroscópio e use delicados aparadores ósseos para cortar cuidadosamente as facetas bilateralmente nas vértebras T7 e T8. Use um bisturi para fazer um corte superficial de 1 milímetro no tecido conjuntivo dorsal entre as lâminas vertebrais T8 e T9, tomando cuidado para não ferir o cordão subjacente, e use aparadores ósseos para remover o processo espinhoso da vértebra T8.

Com uma pinça hemostática curva, cuidadosamente presa no processo espinhoso T7, gire a extremidade caudal das lâminas T8 ligeiramente rostralmente aproximadamente 20 graus e insira os aparadores ósseos sob a lâmina T8. Faça um corte na linha média estendendo-se ao longo da lâmina, continuando a laminectomia repetindo os cortes no lado esquerdo e direito da lâmina vertebral, medial aos processos transversos para expor a medula espinhal.

Goteje 100 microlitros de lidocaína a 2% no canal espinhal exposto e use uma pinça fina e uma tesoura de iridectomia para remover a dura-máter, sobrepondo o segmento espinhal T8. Repita a administração de lidocaína no cordão exposto e identifique a linha média do cordão pela visualização de uma linha central criada entre os processos espinhosos que se estendem entre a vértebra T7 a T9 exposta.

Usando uma pinça fina para estabilizar a medula espinhal, use uma faca de dissecação para hemisseccionar a medula espinhal da linha média em direção a um lado do animal, tomando cuidado para não cortar a artéria espinhal anterior no lado ventral. Usando uma tesoura de iridectomia, corte cuidadosamente qualquer tecido remanescente no lado da lesão da medula espinhal para garantir que o quadrante ventrolateral seja adequadamente seccionado e coloque uma esponja hemostática estéril de aproximadamente 6 por 2 milímetros embebida em solução salina na cavidade exposta acima da medula espinhal.

Em seguida, use pontos de poliglactina 910 4-0 para fechar as camadas musculares e a pele ao redor do local da incisão e coloque o rato em um ambiente quente sob uma lâmpada de calor com monitoramento até a recuperação total.