Estabelecendo um modelo de camundongo de desmielinização focal por meio de uma injeção de dois pontos de lisofosfatidilcolina

Comece com um camundongo anestesiado preso em um aparelho estereotáxico com a cabeça raspada.

Desinfete o couro cabeludo e faça uma incisão para expor o crânio.

Limpe o crânio para remover a camada de tecido conjuntivo.

Usando o ponto de referência no crânio, marque o local alvo e faça um furo.

Pegue uma seringa contendo uma solução de lisofosfatidilcolina, ou LPC, fixada no aparelho estereotáxico.

Determine as coordenadas para dois pontos de injeção na região da substância branca do cérebro e posicione a seringa de acordo.

Injete a solução de LPC e mantenha a agulha no lugar por algum tempo após a injeção em cada local.

Suture a incisão e deixe o animal se recuperar.

No local da injeção, o LPC interage diretamente com a mielina, interrompendo sua estrutura e causando sua quebra.

Isso causa disfunção neuronal local, estabelecendo assim um modelo de desmielinização focal.

Comece conectando uma agulha de calibre 32 a uma seringa de cinco microlitros. Retire 5 microlitros de solução LPC para a preparação da injeção. Em seguida, confirme a profundidade da anestesia do camundongo pela falta de reflexo de pinça do dedo do pé, enquanto a respiração é suave. Posicione o mouse em uma moldur